鼠尾膠原蛋白I 細胞培養
簡要描述：
鼠尾膠原蛋白I 細胞培養 ，膠原蛋白是結締組織和內臟器官細胞外基質的主要構造成分，但在皮膚、肌腱、骨骼中分布較為廣泛。從遺傳和結構上膠原蛋白分為許多類型。
產品時間：2024-03-19
打印當前頁Collagen, Type I, from Rat Tail 鼠尾膠原蛋白I
搜索關鍵詞：
Extracellular Matrix (ECM) 細胞外基質；Gelatin 明膠；Collagen Type I 膠原蛋白I型；Poly-L-lysine 多聚L-賴氨酸；Fibronectin 纖連蛋白；Matrigel基質膠； CAS：9007-34-5 ；
產品信息：
產品名稱 | 產品編號 | 規格 | 價格（元） |
Collagen, Type I, from Rat Tail 鼠尾膠原蛋白I | MX0910-2ML | 2ml (10mg) | 450 |
Collagen, Type I, from Rat Tail 鼠尾膠原蛋白I | MX0910-10ML | 10ml (50mg) | 2000 |
基本介紹：
膠原蛋白是結締組織和內臟器官細胞外基質的主要構造成分，但在皮膚、肌腱、骨骼中分布為廣泛。從遺傳和結構上膠原蛋白分為許多類型。膠原蛋白I（Collagen, Type I）是由2個α1鏈和1個α2鏈組成的異源多聚體，在37℃，中性pH下自發形成三螺旋骨架，是一種優秀的細胞培養用基質，廣泛用于肝細胞、成纖維細胞、脊神經節、肌肉細胞、施萬細胞、胚肺細胞、上皮細胞和其他大量細胞系。還能用于研究細胞生長、分化、遷移以及發育過程中的組織形態發生。
懋康生物提供的鼠尾膠原蛋白I是根據Birkedal-Hansen方法，通過醋酸抽提、氯化鈉沉淀、磷suan氫二鈉沉淀等步驟制備。可用于包被細胞培養器皿，培養細胞表面粘附性，特別適合那些在普通培養器皿表面不易貼壁的細胞，比如成纖維細胞、肝細胞等原代細胞。還可用于三維膠的制備，模擬真實的生長環境，使得細胞在三維環境中生長。
本品為溶于6mM HAc的無菌溶液，濃度5mg/ml，每個批次產品皆通過細胞培養測試（包括三維空間培養）以保證質量的可靠性。
注意事項
整個操作請于冰上進行，因室溫鼠尾膠原I可迅速成膠，操作過程盡量保持低溫。
整個操作請在無菌環境下無菌操作，避免污染以影響細胞生長。
為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
使用方法
1. 細胞培養器皿的表面包被
組織培養器皿的表面包被推薦濃度為1-5µg/cm2，起始濃度可首玄5µg/cm2。建議根據具體細胞類型來優化。
1.1 6mM HAc稀釋液的制備
本品以溶于6mM HAc（=0.36g/L HAc）的無菌溶液形式提供，本身不溶于中性pH，建議用6mM HAc溶液做進一步稀釋。
配制方法：取34.5µl 冰醋酸（17.4 M）加入100ml雙蒸水，充分混勻后即得到6mM HAc溶液，0.22µm濾膜過濾除菌后待用。
1.2 包被步驟
a，根據自身實驗體系以及優化后的包被濃度來計算所需的膠原蛋白量，并加入相應孔內，確保膠原蛋白溶液*覆蓋表面。
以包被濃度為5µg/cm2，先用6mM HAc稀釋液將膠原蛋白（5mg/ml）稀釋到合適的中間濃度，如50µg/ml，
然后參考表1 不同培養皿內膠原蛋白加量表 來加量到各孔內；
以包被濃度為2µg/cm2，先用6mM HAc稀釋液將膠原蛋白（5mg/ml）稀釋到合適的中間濃度，如12µg/ml，然后參考表1 不同培養皿內膠原蛋白加量表來加量到各孔內；
表1 不同培養皿內膠原蛋白加量表
培養皿類型 | 每孔/皿表面積（cm2） | 當包被濃度：2µg/cm2，中間稀釋濃度：12µg/ml，加入該稀釋液的體積（µl） | 當包被濃度：5µg/cm2，中間稀釋濃度：50µg/ml，加入該稀釋液的體積（µl） |
96 well | 0.3 | 50 | 30 |
24 well | 1.9 | 300 | 190 |
12 well | 3.8 | 600 | 380 |
6 well | 9.5 | 1580 | 950 |
35mm | 8 | 1330 | 800 |
60mm | 21 | 3500 | 2100 |
100mm | 55 | 9170 | 5500 |
b，室溫孵育1h，小心吸掉多余液體，用無菌PBS清洗3~4次后直接使用。或者加完膠原蛋白溶液后，在超凈臺內開蓋過夜晾干。無菌條件下，包被好的器皿在4-25℃至少可保存3個月。
2. 三維膠原的制備
當鼠尾膠原蛋白I使用濃度>1mg/ml，pH 7.0左右皆可形成具有一定強度的三維膠，建議成膠濃度為1-2 mg/ml。
由于本品是以溶于6mM HAc的無菌溶液形式提供，在成膠過程需先加入0.06倍體積的0.1M NaOH中和。
2.1 需要溶液準備（無菌、預冷）
2.2 三維膠原制備（不含細胞）（以配制1ml，1mg/ml三維膠為例）：
2.3 三維膠原制備（含細胞）（以配制1ml，1mg/ml三維膠為例）：
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— —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】
上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學和生物技術領域研究的試劑、儀器和實驗室消耗品與實驗服務工作，主要從事細胞生物學、植物學、分子生物學、免疫學、生物化學、蛋白組學。生物制藥與診斷試劑研發生產等領域。 本公司秉承“以人為本，以誠為信、合同守信"的經營理念。堅持"品質保障"的原則為廣大客戶提供優質產品。
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