大腸桿菌化學感受態細胞表達分析
簡要描述：
大腸桿菌化學感受態細胞表達分析BL21 Star (DE3) pLysS菌株來源于BL21(DE3)菌株。DE3命名表明該菌株染色體上整合λ噬菌體DE3溶原體（其上攜帶lacUV5啟動子調控的T7 RNA聚合酶基因），IPTG用來誘導T7 RNA聚合酶的表達。
產品時間：2024-12-16
打印當前頁BL21 Star (DE3) pLysS Chemically Competent Cell
大腸桿菌化學感受態細胞
產品標簽：
BL21 Star (DE3) pLysS；Rosetta (DE3)；BL21 (DE3)；表達感受態細胞；pET表達載體；IPTG誘導；非毒性蛋白表達；
產品訂購：更大包裝或產品技術問題，
貨號 | 產品名稱 | 規格 | 價格（元） |
MF2335-1000UL | BL21 Star (DE3) pLysS Competent Cell大腸桿菌感受態細胞 | 10×100μl | 450 |
MF2335-5000UL | BL21 Star (DE3) pLysS Competent Cell大腸桿菌感受態細胞 | 50×100μl | 1880 |
【好消息】：見我司整理的BL21系列表達感受態細胞常見問題。
產品組分：
組分編號 | 組分名稱 | 貨號（規格） | |
MF2335-1000UL | MF2335-5000UL | ||
MF2335-A | BL21 Star (DE3) pLysS Competent Cell | 10×100μl | 50×100μl |
MF2335-B | Control Plasmid puC19, 10 pg/μl | 10μl | 10μl |
菌株描述
BL21 Star (DE3) pLysS菌株來源于BL21(DE3)菌株。DE3命名表明該菌株染色體上整合λ噬菌體DE3溶原體（其上攜帶lacUV5啟動子調控的T7 RNA聚合酶基因），IPTG用來誘導T7 RNA聚合酶的表達。該菌株含突變的rne基因（rne131），編碼合成截短的RNase E，此酶喪失mRNA水解能力從而提高mRNA轉錄體的穩定性并增加異源蛋白產量。作為大腸桿菌B/r菌株，不含有lon蛋白酶和缺乏外膜蛋白酶OmpT，降低了外源蛋白的降解。
BL21 Star (DE3) pLysS菌株攜帶pLys質粒，具有氯mei素抗性（CamR）。含有表達T7溶jun酶的基因，T7溶jun酶能夠作用于大腸桿菌細胞壁上的肽聚糖溶解大腸桿菌，從而能夠降低目的基因的背景表達水平，但不干擾IPTG誘導的表達。pLys質粒還含有p15A復制起始子，這一起始子使其兼容于pUC或pBR322來源的質粒。
BL21 Star (DE3) pLysS菌株特別設計適用于高拷貝、T7啟動子表達載體（比如pRSET T7載體）的非毒性蛋白的高水平表達。與BL21菌株相比，BL21 Star菌株由于提高的mRNA穩定性，呈現出更高的異源基因基礎表達，因此不適合毒性蛋白表達。然而，BL21 Star (DE3) pLysS菌株比BL21 Star菌株表達更低。
BL21 Star (DE3) pLysS菌株基因型：F-ompThsdSB(rB-mB-)galdcm rne131(DE3) pLysS (CamR)
產品描述
本品是大腸桿菌BL21 Star (DE3) pLysS菌株經特殊工藝制作所得的感受態細胞，可用于DNA的熱擊轉化。經pUC19質粒檢測轉化效率可達107 cfu/μg DNA。且在-80℃能穩定保存幾個月轉化效率不發生改變。
保存與運輸條件
保存：-80℃保存，六個月有效。
運輸：干冰運輸。
注意事項
1） 感受態細胞必須用干冰運輸。感受態細胞應在-80℃保存，不可反復凍融且放置時間過長，否則會減低感受態細胞的轉化效率。
2） 最好在冰上融化感受態細胞。
3） 進行轉化操作時，需在相應溫度及無菌條件下進行。
4） 為防止轉化實驗不成功，可保留部分連接反應液以重新轉化，將損失降到zui低。
5） 產品包裝內含質粒pUC19 DNA(10pg/μl)，供對照實驗用。
6） BL21 Star (DE3) pLysS菌株攜帶pLysS質粒，除復蘇培養基不含抗生素之外，其他所用培養基、培養液都應含有氯mei素（34μg/ml），以防止質粒丟失。
7） 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
使用方法【所有操作均在無菌條件的標準下進行】
1） 從-80℃冰箱取出取感受態細胞，迅速置于冰浴中，5min后待菌塊融化，加入目的DNA，用手輕彈管底輕輕混勻，冰浴靜置25min。
2） 42℃熱激45s，迅速將離心管轉移到冰浴中，冰上靜置2-3min。此過程不要搖動離心管。
3） 向每個離心管中加700 μl無菌的SOC或LB培養基（不含抗生素），混勻后置于37℃ 搖床，200 rpm振蕩培養60min，目的使質粒上相關的抗性標記基因表達，使菌體復蘇。
4） 低速離心收菌（比如4000rpm，2min），留取100μl左右上清，用槍輕輕吹打重懸菌塊，之后加到含氯mei素（34μg/ml）以及所選質粒篩選抗生素的SOC或LB固體瓊脂培養基上，用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開，將平板置于室溫（或37℃）直至液體被吸收，倒置培養，37℃培養12-16h。
【注意】：
a）涂布用量可根據具體實驗調整。若轉化的DNA總量較多，可不用離心，直接取少量轉化產物涂布平板；反之，若轉化的DNA總量較少，則通過離心（4,000 rpm，2min）后吸除部分培養液，懸浮菌體后將其涂布于一個平板中。
b）新制備的固體培養基不易涂干，可將平板正置于37℃直至液體被吸收后再倒置培養。
c）涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的轉化菌落數過少，可以將剩下的菌液再涂布新培養基進行培養。
相關產品
名稱 | 規格 | |
MF2331-1000UL | BL21 (DE3) Competent Cell大腸桿菌感受態細胞 | 10×100μl |
MF2332-1000UL | BL21 (DE3) pLysS Competent Cell大腸桿菌感受態細胞 | 10×100μl |
MF2333-1000UL | Rosetta (DE3) Competent Cell大腸桿菌感受態細胞 | 10×100μl |
MF2341-1000UL | Rosetta-gami(DE3)pLysS Chemically Competent Cell大腸桿菌感受態細胞 | 10×100μl |
MF2339-1000UL | Rosetta-gami 2(DE3) Chemically Competent Cell大腸桿菌感受態細胞 | 10×100μl |
MF2340-1000UL | Rosetta-gami B(DE3) Chemically Competent Cell大腸桿菌感受態細胞 | 10×100μl |
MF2334-1000UL | BL21 Star (DE3) Competent Cell大腸桿菌感受態細胞 | 10×100μl |
MF2335-1000UL | BL21 Star (DE3) pLysS Competent Cell大腸桿菌感受態細胞 | 10×100μl |
MS0023-25G | Streptomycin Sulfate, USP Grade硫酸鏈mei素 | 25g |
MS0021-10G | Chloramphenicol, USP Grade氯mei素 | 10g |
MS0018-10G | Ampicillin, Sodium Salt氨芐青mei素鈉 | 10g |
MS0017-5G | Carbenicillin, Disodium Salt羧芐青mei素二鈉鹽 | 5g |
MS0019-10G | Kanamycin Sulfate硫酸卡那mei素 | 10g |
MS0014-1G | Rifampicin, USP Grade利fu平 | 1g |
— —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】
上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學和生物技術領域研究的試劑、儀器和實驗室消耗品與實驗服務工作，主要從事細胞生物學、植物學、分子生物學、免疫學、生物化學、蛋白組學。生物制藥與診斷試劑研發生產等領域。 本公司秉承“以人為本，以誠為信、合同守信"的經營理念。堅持"品質保障"的原則為廣大客戶提供優質產品。
大腸桿菌化學感受態細胞表達分析大腸桿菌化學感受態細胞表達分析