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重組霍亂毒素B亞基 血清

重組霍亂毒素B亞基 血清

簡要描述:

重組霍亂毒素B亞基 血清霍亂毒素(Cholera toxin,CTX)是霍亂弧菌產生的毒力因子,會引起嚴重腹瀉以及人體脫水。CTX屬于AB5亞基家族。天然六聚體蛋白含兩個亞基,分子量約85kDa

產品時間:2025-06-04

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Recombinant Cholera Toxin B subunit, CF647-conjugated

重組霍亂毒素B亞基(CF647標記,深紅色熒光)



產品信息

產品名稱

產品編號

規格

價格(元)

重組霍亂毒素B亞基(CF647標記,深紅色熒光)

MX0942-100UG

100μg

4786


背景描述

霍亂毒素(Cholera toxin,CTX)是霍亂弧菌產生的毒力因子,會引起嚴重腹瀉以及人體脫水。CTX屬于AB5亞基家族。天然六聚體蛋白含兩個亞基,分子量約85kDa。由一個A亞基(約27.2kDa)和五個B亞基(約11.6kDa/亞基)組成,B亞基以五聚體環的方式排列,呈明顯的五度對稱,負責毒素識別并吸附細胞表面的神經jie苷脂GM1。


A亞基催化刺激性G蛋白α亞基(Gαs)的ADP核糖基化,降低GTPase活性和活化α亞基。Gαs的活化引起腺苷酸環化酶(AC)活性增加,進而促使cAMP水平提高。A亞基還能ADP核糖基化視桿細胞外節膜盤的轉運蛋白,使得GTPase失活。霍亂毒素還是一種高效的黏膜疫苗佐劑,通過抑制IL-12生產來誘導2型輔助性T細胞的免疫應答。


霍亂毒素B亞基(CTB)對細胞無毒,本質上不含腺苷酸環化酶活性。CTB通過結合神經jie苷脂GM1附著到細胞上,是小膠質細胞的良好標記物(這類細胞表面富含神經jie苷脂GM1),但不適合標記少突膠質細胞或星形膠質細胞。CTB是利用組化方法研究軸突運輸的優秀示蹤劑。CTB也是常用的脂筏標記物,脂筏是富含膽gu醇和鞘脂的膜微區,在細胞信號轉導和蛋白質運輸中發揮重要作用。


產品描述

本品是偶聯上深紅色熒光素-CF647(Ex/Em=650/665 nm)的重組霍亂毒素B亞基(rCTB),即Recombinant Cholera Toxin B subunit, CF647-conjugated,簡寫:CF647 conjugated- rCTB,適用于神經學研究中的束路追蹤,靶向神經jie苷脂GM1)結合和逆行運輸。也可在活細胞或固定細胞成像中用作脂筏標記物和內吞示蹤劑。


保存與運輸方法

保存:-20℃保存,至少6個月有效。

運輸:冰袋運輸。


注意事項

1) 本品以凍干粉形式提供,由于量比較少,初次使用前需置于室溫回溫至少30min,低速離心后,再開蓋直接往瓶內加入合適的溶劑進行溶解。

2) CF系列熒光染料是Biotium的注冊商標,Alexa Fluor和DyLight系列染料是Thermo Fisher的注冊商標,Cy系列染料是Cytiva的注冊商標。

3) 本品僅供科研用途,絕不可以用于臨床或診療用途。

4) 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。


使用方法

以下是用熒光標記的rCTB對細胞進行標記的實驗流程。對于其他的應用(比如:神經示蹤),請根據應用查找相應的文獻作為參考。

一、 自行準備材料

1.1 磷酸鹽緩沖液(PBS)(比如:MS3552-500ML)

1.2 牛血清白蛋白(BSA)(比如:MP6101-5G)

1.3 HBSS(比如:MS3505-500ML)

1.4 4%多聚甲醛(比如:MM1504-500ML)

1.5 【可選】Hoehcst 33342(比如:MX4203-10MG,MX4203-1ML,MX4204-10ML)


二、 染料準備

重溶:將低溫保存的CF647 conjugated- rCTB(規格:100μg)置于室溫回溫至少30min,低速離心3-5min,將粉末離心至管底。直接往瓶子加入100μl無菌水或1×PBS使其充分溶解,即得到1mg/ml的母液。

保存:新鮮制備的CF647 conjugated- rCTB(1mg/ml)置于+4℃避光保存,3個月穩定。亦可根據單次用量分裝后,置于-20℃避光保存,6個月穩定,避免反復凍融。


三、 活細胞的表面標記

3.1用4℃預冷的HBSS+0.5% BSA清洗細胞一次;

3.2用4℃預冷的HBSS+0.5% BSA稀釋CF647 conjugated- rCTB(1mg/ml)到工作濃度:400ng/ml-1μg/ml。

3.3吸走細胞內的緩沖液,加入新鮮配置的CF647 conjugated- rCTB染色工作液。+4℃避光孵育30min。

3.4用4℃預冷的HBSS+0.5% BSA清洗細胞三次;

3.5用4%多聚甲醛固定細胞,+4℃避光固定15min。

3.6用PBS清洗細胞二次,之后進行成像或接著做后續的染色。【注:根據實驗需求,考慮是否加入核復染劑-Hoechst 33342等】


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貨號

名稱

規格

MX0931-1ML

Cholera Toxin Solution (50μg/ml), Cell Culture Test霍亂毒素溶液

1ml

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500μg

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100μg

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重組霍亂毒素B亞基(CF680R標記,近紅外熒光)

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重組霍亂毒素B亞基(CF568標記,紅色熒光)

100μg

MX0945-100UG

重組霍亂毒素B亞基(CF640R標記,深紅色熒光)

100μg

MS3505-500ML

1×Hanks平衡yan溶液(含鈣鎂,無酚紅)

500ml

MP6101-5G

BSA, Standard Grade牛血清白蛋白(標準級別)

5g


附錄I幾款CF染料的光譜特征


 CF488A

CF568

CF594

CF640R

CF647

CF680R

最大Abs/Em

490/515 nm

562/584 nm

593/614 nm

642/662 nm

650/665 nm

680/701 nm

摩爾吸光系數

70,000

100,000

115,000

105,000

240,000

140,000

分子量

~914

~714

~730

~832

~836

~912

激發激光線

488nm

532 nm or 568 nm

561 to 568 nm

633, 635 or 640 nm

633 or 635 nm

680 or 685 nm

可替代染料

Alexa Fluor 488

Cy2

DyLight 488

FITC

Alexa Fluor 568

ATTO 565

Rhodamine Red

Alexa Fluor594

Texas Red

DyLight 594

 Alexa Fluor 647, ATTO 647N, Cy5, DyLight 649

Alexa Fluor647

Cy5

DyLight 649

Alexa Fluor680

Cy5.5

DyLight 680

IRDye 680LT

應用

熒光顯微鏡

共聚焦顯微鏡

流式細胞儀

超分辨率成像(STED,TIRF,STORM,SIM, 2-Photon)

共聚焦顯微鏡

單分子成像

超分辨率成像(SIM, TIRF, STED,STORM)

熒光顯微鏡

共聚焦顯微鏡

流式細胞儀

超分辨率成像(STED,2-Photon)

共聚焦顯微鏡

單分子成像

超分辨率成像(STED,SIM,2-Photon,TIRF,FLImP)

熒光顯微鏡

共聚焦顯微鏡

流式細胞儀

超分辨率成像(STORM)

小動物成像儀

超分辨率成像(STORM、3D)

 



 — —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】

 

 

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